1.概述

肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis，RIF）是各种原因的慢性肾脏疾病发展到后期的共同病理学表现，是造成慢性肾脏疾病的主要原因^[1]。目前研究认为RIF病理过程是在炎症、缺血、缺氧等因素作用下，成纤维细胞活化增殖，转分化为肌成纤维细胞并分泌Ⅰ型胶原，最终导致细胞外基质在间质内过度沉积，使肾功能减退直至肾衰竭^[2]。肾间质纤维化主要的病理特征有：肌成纤维细胞增殖和活化，细胞外基质大量沉积，肾小管损伤和炎性细胞浸润^[3-4]。

2.肾间质纤维化的模型复制

单侧输尿管梗阻（Unilateral Uretera Obstruction，即UUO法）大鼠模型是经典的肾间质纤维化模型，通过结扎单侧输尿管引起肾血流动力学和代谢的明显改变，可在短期内造成RIF的病理特点，十分接近人类RIF自发的病理过程^[2]。因此本研究通过结扎单侧输尿管，成功复制了肾间质纤维化模型。

3.肾间质纤维化模型的样本采集及处理

对假手术组和模型组SD大鼠进行解剖，取左侧肾脏，于10%中性福尔马林溶液固定，取材，包埋和切片，并分别进行HE染色、Masson染色和免疫组化I型胶原染色。

4.肾间质纤维化模型的病理学评价标准

以送检组织的不同形态学改变为基础，建立了相关病理学评价标准。其中HE染色的组织切片采用肾脏损伤评分标准进行病理学评分。特殊染色组织切片采用image plus进行光密度值计算观察肾脏组织形态学变化，具体评分标准和面积计算方法如下：

HE染色评分标准：将肾脏组织病变分类，分别对各种类型病变进行评分，对各类型得分及动物总得分进行统计。具体病变类型和病变程度及评分标准详见表1。

Masson染色：以肾脏阳性染色的面积占肾脏总面积百分比计算。半定量评分标准为：0分：无阳性；1分：1％～25％；2分：25％～50％；3分：50％～75％，4分：75％～100％。

5.肾间质纤维化模型显微镜下观察结果

HE染色结果：假手术组大鼠肾小管结构排列整齐，肾小球形态规则，间质正常，未见炎性细胞浸润。模型对照组大鼠可见肾小管变性、肾小管坏死，肾小管萎缩，肾间质炎症和肾间质纤维化。

Masson染色结果：假手术组只在肾小管毛细血管周围、系膜区及肾小球基底膜可见少量胶原；模型对照组大鼠肾脏间质可见Masson阳性染色，较假手术组有大量胶原形成，间质增宽，纤维化成灶状分布，肾间质纤维化程度明显加重。

I型胶原染色结果：假手术组只在血管周围可见少量胶原；模型对照组大鼠肾脏间质可见I型胶原阳性染色，较假手术组肾间质I型胶原沉积程度明显加重。

6.参考文献

[1] 吴君，荆雪宁，沈伟等. 五苓散通过TGF-β1/Smad通路抗大鼠肾间质纤维化的机制研究[J]. 中药新药与临床药理, 2022,33(05):607-615.

[2] 楼晓慧，南丽红，彭卫华等. 筋骨草总黄酮对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾间质纤维化的抑制作用[J]. 福建中医药, 2022,53(06):34-37.

[3] 黄笛，张晓文，谭颖颖. 芪蛭真武汤改善单侧输尿管结扎模型大鼠肾间质纤维化的实验研究[J].辽宁中医杂志,2021,48(08):217-220+261-263.

[4] 高海洋，何海兰，张立国，等. QDPR通过调控Beclin1改善UUO诱导的大鼠肾间质纤维化[J].安徽医科大学学报,2023,58(05):806-811..